Исследование цитотоксичности
Для определения жизнеспособности клеток в культуре мы используем Cell Titer-Glo тестсистему производства Perkin Elmer. Количество жизнеспособных клеток с активным метаболизмом определяется по количеству синтезируемой ими AТФ. Интенсивность люминесцентного сигнала прямо пропорциональна количеству АТФ. Тест-система подходит для применения как в ADME тестах, так и в высокопроизводительном скрининге, как для определения пролиферативной активности клеток, так и для определения цитотоксичности тестируемых веществ. Тест система максимально проста в использовании и работает по принципу “добавить, смешать, считать сигнал”.
Краткое описание метода
Исследование жизнеспособности клеток проводится на культуре клеток 5-10 пассажа. Культура клеток подбирается с учетом задач заказчика. Культура клеток инкубируется с тестируемыми веществами в течение 24 часов. В первичном тесте вещества рутинно тестируют в концентрации 10мкM. Для веществ, показавших цитотоксический эффект, в дальнейшем определяют зависимость цитотоксической активности от концентрации. В качестве контрольного соединения используют туберцидин. Считывание сигнала производят на плашечном ридере Victor Ligth (Perkin Elmer), разработанном для определения люминесценции.
Протокол исследования цитотоксичности
|
Пассаж клеток |
5-10 |
|
Срок культивирования клеток |
72 часа |
|
Концентрация соединения Число повторов |
10 мкМ (по требованию) 2 |
|
Концентрация ДМСО |
0.1 % |
|
Время инкубации с веществами |
24 ч |
|
Метод анализа |
измерение интенсивности люминисценции, Victor Light |
|
Контроли |
туберцидин (токсический аналог аденозина с противовирусным, противотрипанасомным и противогрибковым действием). |
|
Анализируемые параметры |
% жизнеспособных клеток |
|
Число соединений в плашке |
12 + контроль |
ДЛЯ ЗАКАЗА ИССЛЕДОВАНИЙ:
Сизюхин Андрей Владимирович
Руководитель отдела продаж R&D сервисов, доклинические исследования
E-mail: sa@chemrar.ru
Тел.: +7 (495) 925-30-74 +доб.(538)