Исследование цитотоксичности

Для определения жизнеспособности клеток в культуре мы используем Cell Titer-Glo тестсистему производства Perkin Elmer. Количество жизнеспособных клеток с активным метаболизмом определяется по количеству синтезируемой ими AТФ. Интенсивность люминесцентного сигнала прямо пропорциональна количеству АТФ. Тест-система подходит для применения как в ADME тестах, так и в высокопроизводительном скрининге, как для определения пролиферативной активности клеток, так и для определения цитотоксичности тестируемых веществ. Тест система максимально проста в использовании и работает по принципу “добавить, смешать, считать сигнал”.

Краткое описание метода

Исследование жизнеспособности клеток проводится на культуре клеток 5-10 пассажа. Культура клеток подбирается с учетом задач заказчика. Культура клеток инкубируется с тестируемыми веществами в течение 24 часов. В первичном тесте вещества рутинно тестируют в концентрации 10мкM. Для веществ, показавших цитотоксический эффект, в дальнейшем определяют зависимость цитотоксической активности от концентрации. В качестве контрольного соединения используют туберцидин. Считывание сигнала производят на плашечном ридере Victor Ligth (Perkin Elmer), разработанном для определения люминесценции.

Протокол исследования цитотоксичности

Пассаж клеток

5-10

Срок культивирования клеток

72 часа

Концентрация соединения

Число повторов

10 мкМ (по требованию)

2

Концентрация ДМСО

0.1 %

Время инкубации с веществами

24 ч

Метод анализа

измерение интенсивности люминисценции, Victor

Light

 

Контроли

туберцидин (токсический аналог аденозина с противовирусным, противотрипанасомным и

противогрибковым действием).

Анализируемые параметры

% жизнеспособных клеток

Число соединений в плашке

12 + контроль

 

ДЛЯ ЗАКАЗА ИССЛЕДОВАНИЙ:

Сизюхин Андрей Владимирович

Руководитель отдела продаж R&D сервисов, доклинические исследования

E-mail: sa@chemrar.ru

Тел.: +7 (495) 925-30-74 +доб.(538)

ОТПРАВИТЬ ЗАЯВКУ

    Ajax Call Form
    Loading...
    Translate »