Определение клеточной проницаемости на модели Сасо-2(без PGP)

Экспериментальный метод по изучению клеточной проницаемости в Сасо-2 модели входит в панель тестов АДМЕ. Тест-система MultiScreen Caco-2 (Millipore Corp.) используется для исследований транспорта через клеточный монослой. Клетки карциномы кишечника Caco2 морфологически и функционально похожи на барьерный эпителий кишечника и успешно применяются для оценки проницаемости и абсорбции в ЖКТ, а также для изучения активного транспорта веществ.

Краткое описание метода

Исследование транспорта в апикально-базолатеральном (А-В) и базолатеральноапикальном (В-А) направлениях проводится на 21-дневной культуре Сасо-2 в течение 2 ч с веществом в концентрации 1 мкM. Контрольные соединения: ранитидин (низкая проницаемость), пропранолол (высокая проницаемость), по требованию могут использоваться дополнительные контроли. Целостность монослоя подтверждается измерением трансэпителиального электрического сопротивления (TEER) с помощью вольтомметра. Содержание вещества определяется с помощью ВЭЖХ-МС/МС.

Протокол определения клеточной проницаемости на модели Сасо-2

Пассаж клеток

10-50

Срок культивирования клеток

21 день

Концентрация соединения

Число повторов

1, 10 мкМ (по требованию)

3

Концентрация ДМСО

1 %

Время инкубации

2 ч

Метод анализа

ВЭЖХ-МС/МС

 

Контроли

Ранитидин(низкая проницаемость);

Пропранолол (высокая проницаемость);

Измерение сопротивления (целостность монослоя – 3

кОм<TEER)

 

Анализируемые параметры

— Papp (см/с) — проницаемость через клеточный монослой

— индекс асимметрии транспорта (В-А/А-В)

— извлечение, %

Число тестируемых соединений

14 + 2 контроля

 

ДЛЯ ЗАКАЗА ИССЛЕДОВАНИЙ:

Сизюхин Андрей Владимирович

Руководитель отдела продаж R&D сервисов, доклинические исследования

E-mail: sa@chemrar.ru

Тел.: +7 (495) 925-30-74 +доб.(538)

ОТПРАВИТЬ ЗАЯВКУ

    Ajax Call Form
    Loading...
    Translate »