Предсказание возможных метаболитов в микросомах печени
Для разработки лекарственных веществ решающее значение имеет исследование метаболизма препарата. Печень – это наиболее важное место метаболизма лекарственных препаратов в организме. Для предсказания возможных метаболитов 10 мкM раствор препарата инкубируют с микросомальной фракцией печени в течение 1ч при 37˚C в присутствии кофакторов I и II фаз метаболизма (NADPH+UDPGA). Реакцию останавливают добавлением ацетонитрила в нескольких временных точках. После осаждения белков полученные образцы, а также контроль без кофакторов, анализирируют на масс-спектрометре с помощью специализированного программного обеспечения Light Sight. Путем сопоставления данных о получаемых массах фрагментов с известной структурой молекулы, проводится предсказание путей метаболизма препарата.
Протокол теста на предсказание метаболитов в микросомах печени
|
Вид микросом |
Человек, крысы, собаки, мыши, приматы (по требованию) |
|
Концентрация микросом Кофактор |
0.5 мг/мл НАДФН (I) или НАДФН+ УДФГК (II) |
|
Концентрация соединения Число повторов |
10 мкМ (по требованию) 2 |
|
Концентрация ДМСО |
0.01 % |
|
Временные точки |
0, 15, 30, 60 мин (по требованию) |
|
Метод анализа |
ВЭЖХ-МС/МС с использованием программы Light Sight (ABSciex) |
|
Анализируемые параметры |
— MW метаболитов — реакция метаболизма — характеристики метаболитов (хроматограмма с RT, MSMS спектры) — относительное количество тестируемого соединения и каждого метаболита во временных точках, % |
|
Формат |
Индивидуальное тестирование |
ДЛЯ ЗАКАЗА ИССЛЕДОВАНИЙ:
Сизюхин Андрей Владимирович
Руководитель отдела продаж R&D сервисов, доклинические исследования
E-mail: sa@chemrar.ru
Тел.: +7 (495) 925-30-74 +доб.(538)