Тест на определение кинетической растворимости

Экспериментальный метод по изучению кинетической растворимости является универсальным высокопроизводительным тестом панели АДМЕ. Он основан на краткосрочной инкубации водного раствора исследуемого вещества в 96-луночном формате с последующей фильтрацией. Количество вещества в фильтрате детектируется спектрофотометрически по калибровочной прямой.

Изучаемое вещество растворяют в ДМСО до концентрации 10 мМ, затем вносят в водный растворитель (фосфатный буфер, вода, универсальные буферы с различным рН) до концентрации 200 мкМ. Полученный раствор инкубируют в течение часа при комнатной температуре на шейкере в 96-луночном фильтровальном планшете (Millipore’s MultiScreen Solubility Filter Plate), после этого осадок отфильтровывают под вакуумом. Спектр поглощения вещества регистрируют на спектрофотометре в диапазоне 240-400 нм. Для количественных расчетов растворимости используют калибровочную кривую стандартных растворов (0-200 мкМ) с содержанием 40% ацетонитрила. Тестирование проводится в трипликатах, включает контроли с высокой и низкой растворимостью – верапамил и диэтилстилбистрол, соответственно.

Протокол теста на определение кинетической растворимости